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Catalasa y oxidasa |
Prueba de la Catalasa |
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Fundamento |
La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que la prueba es positiva. |
Material y reactivos |
Portaobjetos. H2O2 de 10 volúmenes Cultivos en fase exponencial de bacterias.Asas e hilos de siembra. Pipetas Pasteur |
Mátodo |
1. Colocar una gota de agua oxigenada sobre un portaobjetos con ayuda de una pipeta Pasteur. |
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2. Suspender la bacteria |
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3.Detectar la formación de burbujas |
Prueba de la Oxidasa |
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Fundamento |
Determina la presencia del citocromo C, El citocromo C oxida al NNN'N',tetrametil,1-4,fenilendiamina (solución acuosa al 1% (p/v). La oxidación se detecta como color azul. |
Material y reactivos |
Papel de filtro cortado (trozos de 3x 1 cm) ;Placas de Petri ;Reactivo de oxidasa: Solución al 1% de NNN'N', tetrametil, 1-4 fenilendiamina en agua destilada. El reactivo de oxidasa es bastante tóxico, manejar con precaución. Se altera por la luz y el oxígeno, por lo que debe ser de preparación extemporánea y protegerse envolviéndolo con papel negro |
Método |
1-Poner un trozo de papel de filtro sobre una de las tapaderas de una placa de Petri. 2-Añadir una gota del reactivo de oxidasa. |
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3-. Depositar sobre el reactivo masa bacteriana (actuar de forma rápida y con un asa de platino nueva o con un palillo de dientes) |
Resultado |
La reacción positiva la indica un color azul-violeta intenso antes de 10 segundos |
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La imagen muestra varias bacterias que carecen de citocromo c oxidasa terminal y dos que las poseen (posiciones sobre las 11 y sobre las 13) |