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Aislamiento por siembra en estrías y obtención de un cultivo puro. |
| Material necesario |
TSA (Agar de triptona y soja). Mezcla de dos o más bacterias en solución salina o agua de peptona.Cultivos puros de bacterias. Asas de platino, rotulador, pinzas, etc.. |
| 1. Siembra en estrías |
1.1. Seleccionar un cultivo en placa de TSA que no tenga agua de condensación. |
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1.2. Marcar las placas Petri que contienen el medio de cultivo para aislamiento. Los rótulos deben ser hechos en aquella parte de la placa que lleva el medio. Utilizar placas sin agua de condensación (ni en la tapadera ni en el medio) |
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1.3. Colocar siempre las placas en posición invertida (con el medio de cultivo arriba). Se evitan las contaminaciones y que el agua de condensación caiga sobre el medio. |
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1.4. En condiciones de esterilidad, tomar una gota de la mezcla bacteriana con ayuda de un asa de platino estéril. Si se trata de un cultivo puro (en tubos de TSA inclinados), tomar la menor cantidad de masa bacteriana posible |
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1.5. Los métodos de siembra son variados. Lo importante es avanzar el asa sobre la superficie del medio con estrías muy juntas, nunca superpuestas. Ver video |
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1.6. Incubar las placas, el tiempo y temperatura de incubación adecuados para cada bacteria (si no se indica lo contrario, 37 oC, 24 horas). |
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1.7. Observar las colonias y describir los diferentes tipos encontrados. El alumno puede ayudarse de una lupa pero no es imprescindible |
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1.8. Seleccionar una o dos colonias para obtenerlas en cultivo puro. |
| Resultados: |
Pseudomonas sp. y Staphilococcus aureus (TSA, 24 h 37 oC) |
Providencia sp. y St.aureus(TSA, 24 h 37 oC) |
Salmonella sp. y S. Aures(TSA, 24 h 37 oC) |
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| 2. Obtención de cultivos puros |
2.1. Seleccionar una colonia aislada, y marcarla con ayuda de un lápiz graso o rotulador |
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2.2. Con el asa de platino estéril tocar solo la colonia seleccionada. Ver Video |
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2.3. Inocular un tubo inclinado de TSA o agar nutritivo haciendo estrías muy juntas para obtener un tapiz continuo de masa bacteriana. Ver video |
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2.4. Rotular los cultivos con la información necesaria para su identificación. Incubarlos |