CULTIVO CELULAR |
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Cultivos primarios y secundarios |
INTRODUCCIÓN :Esta introducción explica los tipos de células animales y su utilidad para el cultivo de virus. Los cultivos primarios y secundarios, las cepas diploides y las líneas celulares son las tres categorías que incluyen los cultivos de células animales. El crecimiento de células animales en medios artificiales permite detectar la presencia de virus por cambios en las propiedades de las células y en ocasiones por la muerte celular. Estos cultivos proporcionan técnicas cuantitativas comparables a las empleadas en el estudio de los bacteriófagos. Cultivos primarios y secundarios Las células recuperadas de tejidos animales no tumorales, disgregados se suspenden en soluciones isoosmoticas tamponadas de suero animal con factores de crecimiento y antibióticos. Las células se unen al fondo del recipiente y se multiplican dando un cultivo primario. Todas las células animales excepto las del sistema hematopoyético dependen para su crecimiento de la unión a un soporte sólido (dependencia de anclaje). Los cultivos primarios se mantienen cambiando periódicamente la solución nutritiva. Cuando están demasiado crecidos las células se separan del recipiente y se inician nuevos cultivos secundarios. En ambos cultivos (primarios y secundarios) Las células retienen algunas de las propiedades del cultivo del que derivan, y suelen ser de dos tipos: tipo fibroblasto (delgadas y alargadas dispuestas en paralelo) o poligonales con tendencia a formar láminas (tipo epitelial). Ciertas células tienen bordes redondeados y se asemejan a las epiteliales sin formar láminas (células epitelioides). Los cultivos primarios obtenidos de tejidos tumorales suelen diferir de esta descripción general. |
Cepas diploides |
Cepas diploides. Durante las resiembras (un número limitado de veces) de los cultivos primarios, es posible la selección de algún tipo celular. Las células pueden cultivarse en resiembras sucesivas, hasta su senescencia,lo que constituye una cepa celular ( una cepa celular diploide ). Por ejemplo los cultivos de células humanas suelen morir tras unas cincuenta duplicaciones |
Líneas celulares |
Líneas celulares.En ocasiones, durante la multiplicación de una cepa diploide algunas células crecen mas rápidamente pudiendo aislar clonos de células inmortales. Son las líneas celulares. |
Células vero |
Las “células vero” son una línea celular derivada de riñón de mono verde africano (“vervet”; Cercopithecus aethiops). Se utilizan con frecuencia para la multiplicación de virus y para ensayos de placas. Estas células son las utilizadas en estas prácticas. |