METODOS

Tinciones

Manipulación general  

1-Preparación del portaobjetos

1.1. Limpiar y desengrasar los portaobjetos.

 1.2. Marcar cada portaobjetos para identificar la tinción, microorganismo y autor: rotular (rotulador resistente al agua) por el lado opuesto al de la preparación; pasar lápiz graso sobre el rótulo.
2- Preparación de la muestra:

2.1-Disposición de una alícuota de la muestra sobre el portaobjetos (manejar  los cultivos en condiciones de esterilidad.)

  Si se parte de cultivos en medio líquido se hará directamente Vídeo
  Si se parte de cultivos en medio sólido, una pequeña cantidad de células será suspendida en una gota de agua.  Vídeo 1 Vídeo 2
  2.2. Extensión de las bacterias sobre la superficie del portaobjetos Vídeo
 

La extensión (aproximadamente 1 cm2 ) no contendrá demasiadas células.

  2.3. Desecación de la muestra al aire o con un calentamiento suave Vídeo
  2.4.Fijación :adhesión de las bacterias a la superficie del portaobjetos: Ayudarse de unas pinzas para pasar la cara inferior del portaobjetos por la llama del mechero. Son suficientes dos o tres pases rápidos. Vídeo
3.Las bacterias están dispuestas para la tinción Disponer las preparaciones en las paralelas sobre el cristalizador. Aplicar la manipulación específica de la tinción que se vaya a realizar.
   Los colorantes deben cubrir solo la superficie de la extensión.
  Los lavados con agua deben ser abundantes
4. Tinciones 4.1Tinción de Gram. 4.2 Tinción de endosporas. 4.3 Tinción de ácido-alcohol resistencia
5-Desecación de la tinción 5.1 Al aire, con papel de filtro (sin frotar la preparación), o al calor suave. Comprobar que los rótulos no se han borrado.
6Observación de la tinción