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PROCEDIMIENTO:
A. Test Colorimétricos Directos VER SECUENCIA
SALICILATOS (Test de Trinder). Colocar 1 ml de orina en un tubo de ensayo de 10 ml. Agregar 1 ml de reactivo de Trinder. Resultado positivo: aparecerá, inmediatamente, un color VIOLETA. VER FOTOS FENOTIACINAS (Test FPN). Colocar 1 ml de orina en un tubo de ensayo de 10 ml. Agregar 1 ml del reactivo de fenotiacinas. Resultado positivo: un color VIOLETA indica altos niveles de Clorpromacina u otras fenotiacinas. También pueden obtenerse colores ROSADOS (dependiendo de la dosis y los metabolitos originados). VER FOTOS DIBENZOXACEPINAS. Colocar 1 ml de orina en un tubo de ensayo de 10 ml. Agregar 1 ml de “reactivo de imipramina” (reactivo de Forrest). Resultado positivo: un color AZUL indica ingestión de imipramina o desimipramina. VER FOTOS
B. Cromatografía en capa Fina (CCF)
B. 1. Extracción VER SECUENCIA
Tomar un TOXI-TUBO “A” y otro “B”. Agitarlos vigorosamente para que se homogeneice su contenido. Seguidamente agregar a cada uno de ellos 5 ml de orina, cerrar y agitar para extraer durante 2 minutos. Centrifugar a 2000 rpm / 3 min. VER FOTOS Colocar un “disco A” y otro “B” en sendos pocillos de la placa de evaporación. VER FOTOS Transferir con una pipeta Pasteur desechable la capa orgánica superior del Toxi-tubo (A y B) al pocillo que contiene el disco correspondiente (cuidando de no coger nada de la capa inferior coloreada). VER FOTOS A continuación, colocar los pocillos sobre la placa calefactora (en campana).
VER FOTOS Dejar en la placa calefactora hasta que el disolvente se evapore en su totalidad. VER FOTOS
B. 2. Desarrollo VER SECUENCIA
Tras la evaporación del disolvente, insertar cada disco (A y B) en el orificio correspondiente de una placa (TOXI-GRAM) “A” y “B” con la ayuda de un alfiler. VER FOTOS Transferir 3 ml de la solución de desarrollo “A” y “B” a las cubetas de desarrollo (marcadas “A” y “B”) y añadir a cada una la cantidad necesaria de amoniaco (indicada según cada lote). Agitar suavemente e introducir las placas finas en sus correspondientes cubetas y taparlas. VER FOTOS Cuando las manchas coloreadas (que discurren con el frente) lleguen a 9.50 (aproximadamente 13-15 minutos para el “A” y 15-18 minutos para el “B”) sacar las placas de las cubetas y esperar a que sequen a temperatura ambiente.
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